(2015山东，35)

(12分)【生物—生物技术试验】

乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：

(1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用__________作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是___________。从功能上讲，这种培养基属于___________。

东0b0a心技网科公4f38元根学4f50根广8bf3术-慧4f93司升软8d30途件有高限优 (2)培养微生物L前，宜采用__________方法对接种环进行灭菌。

(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越___________.

(4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的___________确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括___________、_____________、离子吸附法及交联法等。

【答案】 (1)乳糖 凝固剂 选择培养基 (2)灼烧 (3)小

(4)(酶)活性[或(酶)活力] 包埋法 物理吸附法(注：两空可颠倒)

【解析】

件公4f38升软8d30f400限途3036c679学4f50根4d7c慧4f93费方7a206168司技广8bf3术学东0b0a心科网优有高637bbb03元根上-

试题分析：(1)已知乳糖乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用乳糖作为培养基中的唯一碳源，培养基中琼脂的作用是凝固剂，从功能上讲，这种培养基属于选择培养基。

(2)为了避免杂菌污染，在培养微生物前，对接种环等接种工具应采用灼烧灭菌。

(3)用电泳法纯化乳糖酶时，若在相同条件下分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越小，电泳速度越快。

(4)固定化酶的应用价值与酶的活性(或活力)有关，因此用化学结合法固定化乳糖酶时，可通过检测固定化乳糖酶的活性(或活力)来确定其应用价值。固定酶化的方法包括化学结合法、包埋法、物理吸附法、离子吸附法及交联法等。