[2014年高考浙江卷]
下面是关于固定化酶和细菌培养实验的问题。请回答:
(1)某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验,分组见下表。
组别 |
固定化酶柱长度(cm) |
淀粉溶液的流速(mL·min -1 ) |
甲 |
10 |
0.3 |
乙 |
10 |
0.5 |
丙 |
15 |
0.3 |
丁 |
15 |
0.5 |
将吸附了α-淀粉酶的石英砂装入柱中后,需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱,以除去____________。按上表分组,将配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中,然后取一定量的流出液进行KI-I2检测。若流出液呈红色,表明有____________生成;若各组呈现的颜色有显著差异,则流出液中淀粉水解产物浓度最高的是____________组。
(2)下列关于上述固定化酶实验的叙述,错误的是( )
A.固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量
B.淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉
C.各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同
D.淀粉溶液的pH对实验结果有影响
(3)现有一份污水样品,某兴趣小组欲检测其中的细菌数,进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液,用____________法分别接种于固体平面培养基上,经培养后进行计数。该实验应注意,接种前,从盛有____________的容器中将玻璃刮刀取出,放在酒精灯火焰上灼烧,冷却后待用;分组时,需用______________作为对照。
(4)在上述细菌培养实验中进行计数时,应计数的是接种了( )
A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数
B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数
C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数
D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数
[答案] (1)未吸附的α-淀粉酶 糊精 丙 (2)A
(3)涂布分离 70%酒精 未接种的培养基
(4)D
[解析] (1)用蒸馏水洗涤固定化酶柱的目的是洗掉未吸附的α-淀粉酶,防止产物中混有酶等物质;淀粉的产物可以是糊精,可以用KI-I2检测,呈现的颜色是红色;根据表格分析4组实验,如果反应时间越充分,则反应就越充分,流出物中糊精的含量就越高,因丙组的固定化酶柱长度最长,淀粉溶液的流速也越低,所以它的流出物中糊精的含量最高。
(2)酶柱长度和流速决定了反应时间的长短,A项错误。流速过快则反应不够充分,则流出液中含有淀粉,B项正确。实验的自变量是酶柱长度和流速,所以每组实验的淀粉浓度应相同,C项正确。pH大小会影响酶的活性,所以对实验结果会有影响,D项正确。
(3)要检测污水中的细菌数,可采用稀释涂布分离法进行操作,操作过程需注意消毒和灭菌处理,实验中需要设计一个空白对照。
(4)计数统计的是合理处理的稀释样品,计算其培养基上的菌落数,不是细菌数。