[2014年高考山东卷]

人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

件升ad9eb386技有慧司优元46f5智学广a217点东限公费智科网智9c4dbcce-费8573软597d04d6途 (1)htPA基因与载体用________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用____________技术。

(2)为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要经过________，才具备受精能力。

(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的________。

(4)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到__________，说明目的基因成功表达。

[答案] (1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶)　DNA分子杂交(或核酸探针)　(2)超数排卵　获能(处理)　(3)显微注射法　性别鉴定　全能性　(4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物)

件647e7dec广a217点afe6优元46f5智公费智-费8573技bf96科司途的限升ad9eb386软597d04d6东f19eb4af点有慧西学网智9c4dbcce

[解析] (1)基因工程中，重组表达载体构建时，需用同种限制性核酸内切酶切割目的基因和载体，以得到相同的黏性末端便于连接。检测目的基因是否插入受体细胞DNA的常用方法是DNA分子杂交技术(或核酸探针技术)。

(2)胚胎工程中，对供体母羊通常注射促性腺激素以促使其超数排卵，从而获得更多的卵(母)细胞;采集的精子并不具备受精能力，需要在体外获能处理后，才具备该能力。

科司网智9c4dbcce技bf96东f19eb4af点限904e9fae3cec途的广a217点afe6有公费智元46f5智学学量软597d04d6件647e7dec升ad9eb386优4a83-费8573慧西

(3)将重组表达载体导入动物细胞常用的方法是显微注射法。在胚胎移植前，需对胚胎进行性别鉴定以获得所需性别的子代个体。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，体现了早期胚胎细胞的全能性。

(4)基因工程中，目的基因是否成功表达的标志是转基因生物是否产生了目的基因控制合成的蛋白质。