基因工程及其应用

基因工程：

即基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。

原理：基因重组

操作水平：DNA分子水平

结果：定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。

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基因剪刀

限制性核酸内切酶

特点:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定位点切割

结果：产生黏性未端(碱基互补配对)。

举例： 大肠杆菌的一种EcoRI限制酶识别GAATTC序列，并在G和A之间切开)。

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基因探针

DNA连接酶

作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。

基因载体

条件：

1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存

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2、具有多个限制酶切点(每种限制酶切点最好只有一个)，以便与外源基因连接

3、具有标记基因，便于进行筛选

常用的运载体：

质粒、噬菌体和动植物病毒等，都有侵染或进入宿主细胞的能力

质粒是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子.

基因工程基本步骤

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第一步：提取目的基因

注意：要保持基因的完整性

第二步：目的基因与运载体结合

注意：要用同一种限制酶切取目的基因和运载体，并用DNA连接酶连接。

第三步：将目的基因导入受体细胞

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第四步:目的基因的检测和表达

检测标记基因是否表达