1.培养条件

(1) 无菌、无毒的环境：如培养液和培养工具灭菌，培养液中常添加抗生素的抑菌，定期更换培养液，以清除代谢废物，保障营养供应。

(2) 营养：培养液需加入葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等，另外还需加动物血清或血浆。

(3) 温度和pH：如培养哺乳动物细胞，温度控制36.5℃左右;pH：7.2—7.4

(4) 气体环境：一般为95%空气(其中的氧气用于有氧呼吸)+5% CO2 (维持培养液pH)

2. 培养过程，如下图：

要点诠释：

(1)原代培养和传代培养

①原代培养得到细胞株，原代培养的概念有两种表述：

表述一：指没有分瓶之前的细胞培养。

表述二：指第1代及传代10代以内的细胞培养

②传代培养可得到细胞系，细胞系的遗传物质发生了改变，有癌变细胞的特点，传代培养的概念也有两种表述：

表述一：指细胞悬浮液培养一段时间后，分瓶进行的细胞培养。

表述二：指10代以后的细胞培养。

(2)细胞贴壁和接触抑制

①细胞贴壁：进行细胞培养时，一般情况下，细胞悬液中分散的细胞会很快贴附在瓶壁上，即细胞贴壁。

②接触抑制：贴壁细胞不断分裂生长到相互接触时，会停止分裂增殖，这种现象即为接触抑制。

因为有接触抑制现象，所以贴壁生长的细胞一般为单层细胞。

癌变的细胞没有接触抑制现象，可无限增殖。

(3)胰蛋白酶的作用：

①取动物组织后，要用胰蛋白酶处理，分解掉细胞之间的蛋白质，使细胞分散开，便于将其制成细胞悬液。

②在由原代培养转为传代培养时，也需用胰蛋白酶处理贴壁细胞，再制成细胞悬液，以便进行传代培养。

3. 细胞培养(克隆)的应用和意义 (1) 获得具有重要价值的生物制品：如干扰素、病毒疫苗等。 (2) 修复受损伤的器官 (3) 检测有毒物质 (4) 培养正常或病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如筛选抗癌药物等。 (5) 是其他细胞工程技术(如克隆动物、单克隆抗体的制备、基因工程等)的基础

4. 动物细胞培养、植物细胞培养(植物组织培养技术)比较：